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②细胞破碎法单因素试验
选择宁阳圆铃枣(干枣),黑变红枣将一定量的枣皮红枣按一定的比例覆水1h,然后按照比例加水装袋放入烘箱黑变72h,类黑取出黑变红枣将枣肉清洗干净,精的究枣皮放入80℃的稳定烘箱内烘干,粉碎过100目筛,性研放置于密闭容器中备用。黑变红枣按这种方法对黑变枣皮进行处理后,枣皮选取细胞破碎功率、类黑细胞破碎时间作单因素试验,精的究在一定条件下提取后冷却过滤,稳定调pH至中性,性研用蒸馏水做对照,黑变红枣在最大吸收波长下测量类黑精提取液的枣皮吸光度值。
B细胞破碎功率对黑变红枣枣皮类黑精提取效果的类黑影响
在料液比为1:80,细胞破碎时间为10min的条件下,分别考察不同的细胞破碎功率下(20、30、40、50、60、70、80、90、100%)对黑变红枣枣皮类黑精提取效果的影响。
A、细胞破碎时间对黑变红枣枣皮类黑精提取效果的影响
在料液比为1:80,细胞破碎功率20%的条件下,分别考察不同的细胞破碎时间下(10、20、30、40、50、60min)对黑变红枣枣皮类黑精提取效果的影响。
③联动水浴与细胞破碎法响应面优化试验
在单因素试验基础上,根据Box-Behnken试验设计原理,以A(水浴时间)、B(水浴温度)、C(细胞破碎时间)、D(细胞破碎功率)为自变量,以黑变红枣枣皮类黑精吸光度γ为响应值,设计四因素四水平的超声波响应面分析试验,试验因素和水平的取值见表2,对响应面试验结果所得数据采用Design-Expert8.0.6软件进行分析和作图。
(1)黑变红枣枣皮类黑精稳定性的研究
按黑变红枣枣皮→提取剂提取→抽滤→醇沉→抽滤→浓缩滤液→冷冻干燥→黑变红枣枣皮类黑精粗制品方法对黑变枣皮进行处理后,研究光照、温度、金属离子、pH、溶解性、食品添加剂,氧化还原剂,防腐剂对黑变红枣枣皮类黑精稳定性的影响。
①光照对黑变红枣枣皮类黑精稳定性的影响
取一定量的pH=7的类黑精稀释液分别置于室内自然光、日光直射、避光处保存,分别于0、2、4、6、8、10d取样在470nm波长处测定其吸光度值。并计算其吸光度保留率R%(R%=t时刻黑变红枣枣皮类黑精的吸光度/初始时刻黑变红枣枣皮类黑精的吸光度×100%)分析不同光照对黑变红枣枣皮类黑精稳定性的影响。
②温度对黑变红枣枣皮类黑精稳定性的影响
A、加热对黑变红枣枣皮类黑精稳定性的影响
取一定量的pH=7的类黑精稀释液,分别放置在不同温度的水浴锅中保温,水浴锅的温度分别设置为30、40、50、60、70、80、90℃,期间每隔1h取样,在470nm波长处测定其吸光度值。并计算出R%值,分析不同温度对黑变红枣枣皮类黑精稳定性的影响。
③温度对黑变红枣枣皮类黑精稳定性的影响
A、加热对黑变红枣枣皮类黑精稳定性的影响
取一定量的pH=7的类黑精稀释液,分别放置在不同温度的水浴锅中保温,水浴锅的温度分别设置为30、40、50、60、70、80、90℃,期间每隔1h取样,在470nm波长处测定其吸光度值。并计算出R%值,分析不同温度对黑变红枣枣皮类黑精稳定性的影响。
B、室温和冷藏对黑变红枣枣皮类黑精稳定性的影响
取一定量的pH=7的类黑精稀释液,分别放置于室温(17℃)和冷藏(0-4℃)条件下保存,期间每隔一天测一次吸光度值并计算出R%值,连测7天,分析室温和冷藏条件下对黑变红枣枣皮类黑精稳定性的影响。
④金属离子对黑变红枣枣皮类黑精稳定性的影响
配置不同浓度K+、Na+、mg2+、Zn2+、Fe2+、Fe3+、Ca2+、Al3+、黑变红枣枣皮类黑精溶液,未添加金属离子的黑变红枣枣皮类黑精粗提液为对照,放置于室温条件下静置1、6、12、18、24h,并在470nm波长处测定其吸光度值。并计算出其R%值,分析不同的金属离子对黑变红枣枣皮类黑精稳定性的影响。
⑤pH对黑变红枣枣皮类黑精稳定性的影响
分别用不同浓度的HCl与NaOH溶液调节类黑精粗提液的pH的大小,观察黑变红枣枣皮类黑精溶液颜色变化,研究不同pH的大小对黑变红枣枣皮类黑精的影响。
⑥黑变红枣枣皮类黑精的溶解性
取等量的黑变红枣枣皮类黑精粗制品,在室温条件下分别加入蒸馏水、0.1mol/LNaOH、0.1mol/LHCl、乙醇、甲醇、石油醚、氯仿、乙酸乙酯,充分搅拌,静置,观察黑变红枣枣皮类黑精的颜色与溶解性。
⑦食品添加剂对黑变红枣枣皮类黑精稳定性的影响
A、甜味剂对黑变红枣枣皮类黑精稳定性的影响
分别配置不同质量分数(0%、2%、4%、6%、8%、10%)的葡萄糖和蔗糖的黑变红枣枣皮类黑精粗提液,在室温下分别静置0、6、12、18、24h,并在470nm处测定其吸光度值,分析甜味剂对黑变红枣枣皮类黑精稳定性的影响。
B、酸味剂对黑变红枣枣皮类黑精稳定性的影响
分别配置不同质量分数(0%、0.01%、0.05%、0.1%、0.5%)的柠檬酸和抗坏血酸的黑变红枣枣皮类黑精粗提液,在室温下分别静置0、6、12、18、24h,并在470nm处测定其吸光度值,分析酸味剂对黑变红枣枣皮类黑精稳定性的影响。
⑧氧化还原剂对黑变红枣枣皮类黑精稳定性的影响
分别配置不同质量分数(0%、0.01%、0.05%、0.1%、0.5%)的Na2S03和H2O2的黑变红枣枣皮类黑精粗提液,在室温内分别静置0、6、12、18、24h,并在470nm处测定其吸光度值,分析氧化还原剂对黑变红枣枣皮类黑精稳定性的影响。
⑨防腐剂对黑变红枣枣皮类黑精稳定性的影响
分别配置不同质量分数(0%、0.01%、0.05%、0.1%、0.5%)的苯甲酸钠和山梨酸钾的黑变红枣枣皮类黑精粗提液,在室温内分别静置0、6、12、18、24h,并在470nm处测定其吸光度值,分析防腐剂对黑变红枣枣皮类黑精稳定性的影响。
二、结果与分析
1、黑变红枣枣皮类黑精最大吸收波长的测定
类黑精的紫外可见光谱图由图1所示,在200~400nm处有最大吸收峰,这些主要是美拉德反应的中间产物等低分子的特征吸收峰,在470nm处的吸收峰为美拉德反应的大分子的特征吸收峰,因此测定黑变红枣枣皮类黑精的最佳吸收波长为470nm。
2、超声法辅助提取黑变红枣枣皮类黑精条件研究
(1)超声温度对黑变红枣枣皮类黑精提取效果的影响
超声温度对类黑精提取效果的影响如图2所示,类黑精的吸光度随着温度的升高而逐渐增加,最后趋于平缓,随着温度的升高,超声波清洗机会放出大量的热和产生强大的剪切力,使得类黑精的结构被破坏,吸光度会逐渐降低,为了避免类黑精结构被破坏,选择最佳的超声温度为60℃。
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相关链接:乙酸乙酯,乙醇,氯仿,蔗糖
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